期刊简介
本刊是反映多学科科研、医疗及教学的理论性学术刊物。主要刊载专家述评、基础医学、临床医学、综述、病例报告、医学教育等方面的文章。本刊为中国科技论文统计源期刊所引证。
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首页>大连医科大学学报杂志
- 杂志名称：大连医科大学学报杂志
- 主管单位：辽宁省教育厅
- 主办单位：大连医科大学
- 国际刊号：1671-7295
- 国内刊号：21-1369/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
靶向人核糖核酸酶抑制因子双抗性的 shRNA 逆转录病毒载体构建及鉴定
李坤；丁宁
关键词：人核糖核酸酶抑制因子, shRNA, 逆转录病毒载体
摘要：目的：构建靶向人核糖核酸酶抑制因子（ hRI）新霉素-潮霉素B双抗性的shRNA逆转录病毒载体，为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用机制提供依据。方法用亚克隆法，将潮霉素B抗性基因hygr从载体pIRES-hygr2克隆到pLNCX-pKD-dsRI-neor与pLNCX-pKD-neor 上，用酶切筛选得到阳性重组质粒pLNCX-pKD-dsRI-neor -hygr与pLNCX-pKD-neor -hygr。转染时设干扰组、空载体组和空白组。用脂质体法将pLNCX-pKD-dsRI-neor （干扰组）、pLNCX-pKD-neor -hygr （空载体组）转染到人肝癌细胞SMMC77细胞中，未处理的细胞作空白组，用400 mg/L G418和200 mg/L潮霉素B筛选3～4周产生稳定的细胞克隆后，用Western blotting检测细胞中核糖核酸酶抑制因子表达的变化。结果酶切结果证明重组质粒构建成功；Western blotting表明，与空白组（0．1810±0．015）和空载体组（0．1951±0．027）相比，干扰组RI表达（0．0311±0．048）明显下调（P＜0．05）。结论成功构建的靶向人核糖核酸酶抑制因子新霉素-潮霉素B双抗性的shRNA逆转录病毒载体能下调RI基因的表达。
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