期刊简介
本刊是反映多学科科研、医疗及教学的理论性学术刊物。主要刊载专家述评、基础医学、临床医学、综述、病例报告、医学教育等方面的文章。本刊为中国科技论文统计源期刊所引证。
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首页>大连医科大学学报杂志

- 杂志名称:大连医科大学学报杂志
- 主管单位:辽宁省教育厅
- 主办单位:大连医科大学
- 国际刊号:1671-7295
- 国内刊号:21-1369/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:Caj-cd规范获奖期刊期刊收录:剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
体外RNAi对S100A4基因表达及其对骨肉瘤细胞侵袭、转移能力的影响
马旭;杨毅欣;王岩峰;安贵峰;商冠宁;吕刚
关键词:RNA干扰, 骨肉瘤, S100A4, 侵袭, 转移
摘要:[目的]应用RNAi技术抑制人骨肉瘤MG-63细胞S100A4基因的表达,并观察对MG-63细胞增殖及体外侵袭能力的影响.[方法]合成针对S100A4的siRNA载体,并根据目的mRNA序列,设计3条RNA干扰靶序列及非特异性的siRNA.将培养细胞分为C组(空白对照组);C1组(转染脂质体组);C2组(转染非特异性的siRNA 组);S1、S2、S3组(转染特异性的siRNA Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组).荧光倒置显微镜下观察转染情况,Real-time PCR方法检测转染前后S100A4基因表达变化,应用Western-Blot方法检测转染前后S100A4蛋白表达变化.筛选出转染效率高的特异性siRNA组作为后续实验的实验组.后续实验分为正常细胞组,阴性对照组和实验组,应用MTT法和平板克隆形成实验检测细胞的增殖率变化,应用Transwell小室实验检测细胞的侵袭及转移能力变化.[结果]倒置显微镜下C2组与S1、S2、S3组培养细胞的细胞浆均可见绿色荧光.S1、S2与S3组的S100A4 mRNA表达水平均有不同程度的下调,以S3组为显著.Western-Blot检测S100A4蛋白表达结果与其相符.MTT法和平板克隆形成实验均显示S3组细胞增殖受到抑制,与正常细胞组、阴性对照组比较差异有显著性意义(P<0.05).Transwell小室实验显示RNA干扰S100A4基因表达后肿瘤细胞的运动侵袭能力明显下降,穿过人工基底膜细胞数量明显减少,与正常细胞组、阴性对照组相比差异有显著性意义(P<0.05).[结论]体外合成的S100A4特异性siRNA能够抑制骨肉瘤细胞系MG-63的S100A4表达,进而抑制细胞的增殖和体外侵袭能力.
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