期刊简介

               本刊是反映多学科科研、医疗及教学的理论性学术刊物。主要刊载专家述评、基础医学、临床医学、综述、病例报告、医学教育等方面的文章。本刊为中国科技论文统计源期刊所引证。                

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  • 杂志名称:大连医科大学学报杂志
  • 主管单位:辽宁省教育厅
  • 主办单位:大连医科大学
  • 国际刊号:1671-7295
  • 国内刊号:21-1369/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:Caj-cd规范获奖期刊期刊收录:剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
大连医科大学学报杂志2010年第01期

实时荧光定量RT-PCR检测急性白血病中Bmi-1基因mRNA的表达及意义

于琦;孟秀香;袁宏;王楠;姜艳梅;马末娇

关键词:Bmi-1基因, 急性白血病, SYBR greenⅠ, 实时荧光定量RT-PCR
摘要:[目的]建立荧光实时定量RT-PCR ( FQ RT-PCR)检测Bmi-1基因mRNA的方法并研究该基因在急性白血病细胞中表达的意义.[方法]根据 Genbank提供的序列,设计目的基因Bmi-1及内参基因GAPDH的扩增引物,将 Bmi-1及GAPDH RT-PCR扩增片段克隆入载体pMD18-T simple,经测序鉴定正确后,进行纯化、定量及系列稀释,应用 SYBR GreenⅠ荧光染料,建立检测Bmi-1 mRNA的FQ RT-PCR方法,并对其线性及特异性进行评价.应用此方法检测21例急性白血病及10例健康人外周抗凝血中Bmi-1 mRNA的表达水平.[结果]该方法的线性范围为1.0×103~1.0×108copies/μL,相关系数为-1.00,熔解曲线分析扩增产物显示单一的峰,熔解温度(Tm)为80.4℃.急性白血病患者的相对表达量为0.56±0.12,健康对照组中Bmi-1 mRNA的相对表达量为0.19±0.08,两者的表达差异有统计学意义(P<0.05).[结论]实时荧光定量RT-PCR方法检测Bmi-1基因表达,具有高敏感性和高特异性等优点,可作为进一步研究 Bmi-1基因的方法.Bmi-1基因参与急性白血病的发生,可能是一种新的肿瘤标志物.