期刊简介
本刊是反映多学科科研、医疗及教学的理论性学术刊物。主要刊载专家述评、基础医学、临床医学、综述、病例报告、医学教育等方面的文章。本刊为中国科技论文统计源期刊所引证。
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首页>大连医科大学学报杂志
- 杂志名称：大连医科大学学报杂志
- 主管单位：辽宁省教育厅
- 主办单位：大连医科大学
- 国际刊号：1671-7295
- 国内刊号：21-1369/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
转录抑制因子Bmi-1基因正、反义真核表达载体的构建及鉴定
刘丹丹；孟秀香；刘奔；范颖；王莺燕；刘卫红
关键词：转录抑制因子, 基因克隆, 表达栽体
摘要：[目的]克隆转录抑制因子Bmi-1基因并构建其正、反义真核表达载体,为研究其功能及其作用机制奠定基础.[方法]根据Bmi-1基因已知序列,设计合成一对引物,上下游引物分别加入XhoI和ClaI的酶切位点,用反转录PCR(RT-PCR)方法从人红白血病细胞株(K562)总RNA中扩增编码Bmi-1的基因片段(1017 bp),插入克隆载体pMD18-T,构建pMD18-Bmi-1载体,经限制性核酸内切酶谱证实后,再克隆至逆转录病毒载体pLNCX2中,构建pLNCX2-Bmi-1真核表达栽体,并经测序证实.然后以pLNCX2-Bmi-1为模板,物扩增Bmi-1基因起始密码子及编码锌指结构区域上下171 bp长度的核苷酸片段,并反向连接于表达载体(pLNCX2)上.[结果]DNA测序表明编码序列与读框完全正确,RT-PCR扩增出和目的片段相同的片段,正义DNA片断长度为1029 bp.反义片断长度为171 bp,Bmi-1基因被成功扩增并被克隆至真核表达载体pMD18-T和pLNCX2中.[结论]Bmi-1正义及反义片断被成功扩增,并成功构建了Bmi-1正、反义重组真核表达栽体,为进一步研究该基因打下了基础.
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