期刊简介
本刊是反映多学科科研、医疗及教学的理论性学术刊物。主要刊载专家述评、基础医学、临床医学、综述、病例报告、医学教育等方面的文章。本刊为中国科技论文统计源期刊所引证。
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首页>大连医科大学学报杂志
- 杂志名称：大连医科大学学报杂志
- 主管单位：辽宁省教育厅
- 主办单位：大连医科大学
- 国际刊号：1671-7295
- 国内刊号：21-1369/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
pCDNA3.1-Annexin A7载体的构建及在Hea-P细胞中的表达
王志强；唐建武；王绍青；孙成荣；王波
关键词：膜联蛋白A7, PCR, 转染, 肿瘤, 淋巴道转移
摘要：[目的]构建pCDNA3.1-Annexin A7载体并稳定转染Hca-P细胞.[方法]提取小鼠总RNA,逆转录成cD-NA,PCR扩增,获取Annexin A7 CDS,将PcDNA3.1(+)质粒和Annexin A7 CDS片段行BamH I和EcoR I双酶切,构建并抽提pCDNA3.1-Annexin A7质粒,测序鉴定后转染Hca-P细胞,经400 μg/mL G418完全培养基筛选获得pCDNA3.1-Armexin A7载体稳定转染的Hca-P细胞,在蛋白质水平检验Annexin A7的表达并行基因组DNA鉴定.[结果]成功构建pCDNA3.1-Annexin A7载体,经测序鉴定,所得到的载体中的CDS经比对与库中序列一致.pCDNA3.1-Annexin A7载体转染Hca-P细胞后,获得稳定上调表达Annexin A7的Hca-P细胞株;行基因组DNA鉴定,证实pCDNA3.1-Annexin A7已转入Hca-P细胞中,western-blotting结果显示转染前后蛋白的表达相对值Annexin A7/GAPDH分别为0.43544±0.0112和0.45957±0.0065(P＜0.05).[结论]pCDNA3.1-Annexin A7的构建并稳定转染Hca-P细胞成功,为通过上调Annexin A7在Hca-P的表达以证实Annexin A7与恶性肿瘤淋巴道转移潜能关系的相关研究打下了基础.
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