期刊简介
本刊是反映多学科科研、医疗及教学的理论性学术刊物。主要刊载专家述评、基础医学、临床医学、综述、病例报告、医学教育等方面的文章。本刊为中国科技论文统计源期刊所引证。
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首页>大连医科大学学报杂志
- 杂志名称：大连医科大学学报杂志
- 主管单位：辽宁省教育厅
- 主办单位：大连医科大学
- 国际刊号：1671-7295
- 国内刊号：21-1369/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：Caj-cd规范获奖期刊期刊收录：剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
白细胞介素-23基因的克隆及真核双表达载体的构建
谭广；王晓刚；程雷；罗海峰；王忠裕；殷朔
关键词：IL-23基因, 克隆, 真核表达载体
摘要：[目的]通过分别克隆白细胞介素-23(IL-23)基因的双亚基p19和p40,构建pcDNA3-IL-23真核双表达载体,为通过IL-23基因转染树突状细胞(dendritic cell, DC)增强其介导的免疫抗肿瘤作用提供基础.[方法]一步法从小鼠脾脏及胸腺中提取p19和p40总RNA,RT-PCR法扩增p19和p40的cDNA,扩增产物与pMD18-T vector连接并热转化至大肠杆菌JM109, PCR法筛选阳性克隆,提取质粒并进行DNA的测序鉴定,将pMD18-p19和pMD18-p40分别限制性酶切,在对pcDNA3表达载体限制性酶切后将切胶回收的p19和p40片段分别克隆至pcDNA3.0表达载体, 对阳性质粒进行XhoI/KpnI双酶切检测,琼脂糖凝胶电泳分析.[结果]脾脏及胸腺中提取p19和p40总RNA电泳鉴定是完整的,克隆的p19和p40 cDNA经测序鉴定与Genebank中序列完全一致.构建的pcDNA3.0-p19和pcDNA3.0-p40质粒分别限制性酶切后得到了593 bp和1028 bp的基因片段;构建的pcDNA3.0-IL-23表达载体限制性酶切后得到了1.62 kbp的p19+p40片段.[结论]成功克隆了小鼠IL-23基因,并分别构建了pcDNA3-p19、pcDNA3-p40和pcDNA3-IL-23真核表达载体,为IL-23基因转染DC来增强其免疫活性创造了条件.
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