期刊简介

               本刊是反映多学科科研、医疗及教学的理论性学术刊物。主要刊载专家述评、基础医学、临床医学、综述、病例报告、医学教育等方面的文章。本刊为中国科技论文统计源期刊所引证。                

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  • 杂志名称:大连医科大学学报杂志
  • 主管单位:辽宁省教育厅
  • 主办单位:大连医科大学
  • 国际刊号:1671-7295
  • 国内刊号:21-1369/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:Caj-cd规范获奖期刊期刊收录:剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 万方收录(中), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
大连医科大学学报杂志2005年第01期

含AFP启动子腺病毒载体构建的基础研究

韩秀敏;张阳

关键词:AFP启动子, E1A, 条件复制腺病毒, 同源重组, 肿瘤
摘要:[目的]为提高基因治疗载体的靶向性,在现有的溶瘤性腺病毒基础上,应用细菌内同源重组方法构建含AFP启动子和E1A基因的条件复制性腺病毒载体.[方法]应用限制性内切酶以及体外重组技术获取目的片段AFP-AP-IRES-E1Am并进行重组质粒的筛选;将目的片段插入Pshuttle穿梭质粒中;重组的Pshuttle质粒应用PmeI线性化,与含腺病毒骨架DNA、删除了腺病毒E1、E3区的pAdEasy1质粒在BJ5183大肠杆菌细胞中同源重组形成新重组体;抽提重组体DNA,用PacI酶切后,转染至人胚肾细胞株HEk293细胞中进行复制包装,扩增纯化;进行病毒检测.[结果]经用具有Amp抗性及kan抗性的培养板和多种限制性内切酶酶切筛选,证实应用同源重组方法构建了含AFP启动子和目的基因E1A的腺病毒载体;该重组腺病毒可转染HEk293细胞,并进行有效复制.[结论]成功构建了具有特异靶向性的条件复制腺病毒载体,为进一步研究该腺病毒的功能提供了条件.